非變性蛋白(bái)電(diàn)泳Marker轉膜問題

非變性蛋白(bái)電(diàn)泳Marker轉膜問題

1. 所有的預染蛋白(bái)Marker都是變性Marker，不适用于非變性電(diàn)泳。

2. 蛋白(bái)非變性電(diàn)泳條件(jiàn)下(xià)，不能(néng)精确判斷蛋白(bái)的分子量大小(xiǎo)。因為(wèi)在非變性條件(jiàn)下(xià)，蛋白(bái)的電(diàn)荷，空間結構，物(wù)化性質等都對蛋白(bái)的遷移有影響。

3. 非變性蛋白(bái)電(diàn)泳Marker（RTD6137，RTD6142，RTD6144）由于要保持蛋白(bái)的天然結構，都沒有偶聯染料，在電(diàn)泳時基本都看(kàn)不到(dào)條帶；然而，RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白(bái)中含有鐵離子，使得電(diàn)泳後在膠上(shàng)可見(jiàn)淡黃色，其中440 kD顔色更深。凝膠轉膜後，膜上(shàng)也可以看(kàn)到(dào)黃色的440 kD條帶（下(xià)圖），可以大體判斷Marker轉膜的效果。

4. 有兩種方法可以解決非變性Marker轉膜後條帶顯示問題：

第一(yī)種方法：凝膠轉膜後用麗春紅(hóng)染色液（貨号：RTD6301）染膜，可以看(kàn)到(dào)Marker條帶，順便可以檢測轉膜效率，然而要注意的是麗春紅(hóng)染色靈敏度比較低(dī)，可能(néng)不能(néng)完全看(kàn)到(dào)完整的Marker條帶。

       注：北(běi)京師(shī)範大學惠贈圖片

第二種方法（下(xià)圖）：電(diàn)泳結束後，把含有Marker泳道的凝膠切下(xià)，單獨用考馬斯亮藍染色液染色（貨号：RTD6202），剩餘的凝膠去完成轉膜到(dào)ECL發光(guāng)檢測過程，最後的發光(guāng)結果和Marker染色結果拼接判斷條帶範圍。