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非變性蛋白(bái)電(diàn)泳Marker轉膜問題

news_detail-248.html

非變性電(diàn)泳蛋白(bái)質Marker（45-880 kD）

Native Electrophoresis Protein Marker（45-880 kD）

●産品編号及規格：

RTD6137   20次 100 μl

●儲存及運輸條件(jiàn)：

-20℃保存，濕冰運輸，有效期為(wèi)12個(gè)月(yuè)。

● 産品簡介：

    本産品有4種蛋白(bái)組成，分子量範圍為(wèi)45-880 kD，經過非變性電(diàn)泳後，用考馬斯亮藍染色後可以得到(dào)5條主帶。

● 使用說明：

1. 取出産品後，常溫融化後，徹底混勻，上(shàng)樣電(diàn)泳。

注：上(shàng)樣量根據膠的厚度和梳子的寬度确定。一(yī)般說來，1.0厚度10齒梳子加樣孔上(shàng)樣5 μl，1.0厚度15齒梳子加樣孔上(shàng)樣量2.5 μl，其他規格梳子請适當調整上(shàng)樣量。

2. 該産品不含蛋白(bái)凝膠制備試劑，您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電(diàn)泳試劑盒（貨号：RTD6130）或者蛋白(bái)預制膠（貨号RTD6118）。如自(zì)備試劑，經典Laemmli系統中把制膠溶液、電(diàn)泳緩沖液和上(shàng)樣緩沖液中的SDS和還(hái)原劑（DTT或β-巯基乙醇）全部去除即可進行非變性電(diàn)泳。

3. 電(diàn)泳條件(jiàn)：

建議使用8%非變性等度膠或者4-15%非變性梯度膠進行電(diàn)泳。

4. 電(diàn)泳結束後，考馬斯亮藍染色，觀察結果。

注：使用銀(yín)染染色時，由于靈敏度高(gāo)于考馬斯亮藍染色方法，需要适當降低(dī)Marker上(shàng)樣量，一(yī)般稀釋50倍後上(shàng)樣。

注意：

1.本蛋白(bái)Marker不适用于變性蛋白(bái)電(diàn)泳(SDS-PAGE)。
2. 蛋白(bái)非變性電(diàn)泳條件(jiàn)下(xià)，不能(néng)精确判斷蛋白(bái)的分子量大小(xiǎo)。因為(wèi)在非變性條件(jiàn)下(xià)，蛋白(bái)的電(diàn)荷，空間結構，物(wù)化性質等都對蛋白(bái)的遷移有影響。
3.非變性蛋白(bái)電(diàn)泳Marker（RTD6137，RTD6142，RTD6144）由于要保持蛋白(bái)的天然結構，都沒有偶聯染料，在電(diàn)泳時基本都看(kàn)不到(dào)條帶；然而，RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白(bái)中含有鐵離子，使得電(diàn)泳後在膠上(shàng)可見(jiàn)淡黃色，其中440 kD顔色更深。凝膠轉膜後，膜上(shàng)也可以看(kàn)到(dào)黃色的440 kD條帶，可以大體判斷Marker轉膜的效果。
4. 非變性Marker轉膜後可以後用麗春紅(hóng)染色液（貨号：RTD6301）染膜，可以看(kàn)到(dào)Marker條帶，順便可以檢測轉膜效率，然而要注意的是麗春紅(hóng)染色靈敏度比較低(dī)，可能(néng)不能(néng)完全看(kàn)到(dào)完整的Marker條帶。

使用RTD6137非變性電(diàn)泳蛋白(bái)質Marker（45-880 kD）産品發表部分文章列表：

1. [2022 IF=8.0] Tektin bundle interacting protein, TEKTIP1, functions to stabilize the tektin bundle and axoneme in mouse sperm flagella

Author: Xin?Yan Geng,Hui?Juan Jin, Lan Xia.Bin?Bin Wang,Su?Ren Chen

Marker: RTD6137非變性電(diàn)泳蛋白(bái)質Marker（45-880 kD）

Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2024) 81:118 

Institution: Beijing Normal University

Paper link：https://doi.org/10.1007/s00018-023-05081-3