Western快速封閉液
Rapid Blocking Buffer for
WB
● 産品組成:
貨号
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名稱
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規格
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保存條件(jiàn)
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WR5020-100ml
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Western快速封閉液
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100 ml
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2-8℃
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WR5020-500ml
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Western快速封閉液
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500 ml
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2-8℃
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說明書
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一(yī)份
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● 産品簡介:
本産品專為(wèi)快速高(gāo)效封閉Western Blot 轉印膜而設計,避免抗體與封閉劑的非特異結合,最大程度地降低(dī)了背景。同時,本封閉劑無内源的磷酸化蛋白(bái)及生(shēng)物(wù)素,對磷酸化特異抗體及生(shēng)物(wù)素檢測也不會(huì)産生(shēng)幹擾。本封閉劑不與蛋白(bái)産生(shēng)非特異性結合,因而隻封閉膜而不會(huì)屏蔽樣品蛋白(bái)的抗體識别位點,大大提高(gāo)了抗體檢測靈敏度。實驗表明,本封閉劑對許多(duō)抗體都有不同程度的信号增強作用。然而這種信号增強作用因抗體而異,對某一(yī)特定抗體,并不一(yī)定具有确定的信号增強作用。
注意: 沒有任何一(yī)種封閉劑能(néng)适合所有抗原和抗體的檢測系統。如出現本試劑不适合的抗體,請替換使用其它種類的封閉劑如BSA或脫脂奶粉等。
● 貯存、效期及運輸:
2-8℃貯存,有效期一(yī)年(nián),常溫運輸。
● 注意事(shì)項:
1. 快速高(gāo)效:5-10 min内完成封閉;隻結合封閉轉印膜而不結合蛋白(bái),因此不會(huì)屏蔽樣品蛋白(bái)的抗體識别位點,與傳統的脫脂奶粉和BSA 封閉相(xiàng)比信噪比更高(gāo);
2. 方便快捷:無需稀釋,即取即用;
3. 性能(néng)可靠:與抗體無交叉反應;
4. 應用範圍廣:無磷酸化蛋白(bái),無生(shēng)物(wù)素,尤其适合磷酸化特異抗體及生(shēng)物(wù)素檢測系統;
5. 節省抗體:使用本封閉劑後,所需的最适抗體濃度低(dī)于常規使用濃度,可大大節省抗體使用量。
6. 與PVDF膜相(xiàng)比,NC膜需要更長(cháng)時間的封閉。
● 使用說明:
1. 本産品無需稀釋,開(kāi)蓋即用。
2. 完成轉膜後,使用TBST漂洗轉印膜3次,每次5分鍾;
3. 将轉印膜放(fàng)入到(dào)雜(zá)交孵育盒中,加入10-20 ml快速封閉液完全覆蓋轉印膜,置于搖床輕輕搖動,參考下(xià)表确定封閉時間:
膜類型
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推薦封閉時間
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反應溫度
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PVDF膜
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5-10分鍾
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常溫 25度
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NC膜
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10-20 分鍾
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常溫25度
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注意:使用本産品,PVDF膜和NC膜使用推薦封閉時間,經多(duō)種抗體的測試封閉效果顯著優于常規的BSA封閉1 h。對于一(yī)些背景非常高(gāo)的抗體,可以嘗試延長(cháng)封閉時間。如有特殊需要,也可4℃封閉過夜。
4. 封閉結束後棄去封閉液,進行Western Blot後續操作。