1×SDS-PAGE快速電(diàn)泳緩沖液(變性電(diàn)泳,粉末型)
● 産品組成:
貨号
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名稱
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規格
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TG190P
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1×SDS-PAGE快速電(diàn)泳緩沖液(變性電(diàn)泳,粉末型)
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10×1L
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說明書
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一(yī)份
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● 産品簡介:
本産品為(wèi)即用型SDS-PAGE快速電(diàn)泳緩沖液(Fast
Running Buffer for SDS-PAGE),由Tris-Glycine電(diàn)泳緩沖液優化而來,适用于Tris-Glycine體系(Laemmli體系)蛋白(bái)凝膠電(diàn)泳。與傳統的Tris-Glycine電(diàn)泳緩沖液相(xiàng)比,使用本産品電(diàn)泳時無需根據分離膠和濃縮膠調整不同電(diàn)壓,可全程200-250 V恒壓電(diàn)泳,約20-35 min可完成電(diàn)泳,大大節約時間,并且對小(xiǎo)分子蛋白(bái)分離效果更好,可使預染蛋白(bái)Marker中10
kD與15 kD條帶分離并清晰可見(jiàn)(凝膠濃度8%以上(shàng)),達到(dào)快速高(gāo)效分離蛋白(bái)的作用。
本産品為(wèi)預混粉末,使用前需要用水(shuǐ)配制溶解,但無需調節pH值,pH
8.0-8.5。
● 貯存和效期:
常溫貯存,常溫運輸,有效期2年(nián);配成溶液後,4℃貯存,有效期1-2周。
● 用前必讀(dú):
1. 和傳統的SDS-PAGE電(diàn)泳液(Laemmli系統,1×Tris-Glycine-SDS電(diàn)泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1%
SDS,pH8.3)相(xiàng)比,本快速電(diàn)泳液可以大幅加快電(diàn)泳速度,縮短電(diàn)泳時間。推薦150-200V恒壓電(diàn)泳,通(tōng)常20-35分鍾就(jiù)能(néng)完成電(diàn)泳。
2.
使用快速電(diàn)泳緩沖液單闆膠電(diàn)泳時,穩壓200
V,起始電(diàn)流在60-70 mA,如果同時電(diàn)泳2闆膠或者4闆膠,電(diàn)流會(huì)升高(gāo),請根據需求采取降溫措施。
3. 對于低(dī)濃度例如6%、8%或10%的固定濃度膠,本快速電(diàn)泳液比傳統電(diàn)泳液具有更好的分離效果,可以達到(dào)類似梯度膠的分離效果,更适合小(xiǎo)分子量蛋白(bái)電(diàn)泳。産生(shēng)相(xiàng)同分離效果時,使用本快速電(diàn)泳液可使用濃度更低(dī)的分離膠,例如使用傳統電(diàn)泳液對10%、12%或15%分離膠進行電(diàn)泳時,使用本快速電(diàn)泳液時對應的分離膠隻需要分别為(wèi)6%、8%和10%,電(diàn)泳效果基本一(yī)緻。并且由于膠濃度較低(dī),可以增強轉膜效率,提高(gāo)WB檢測靈敏度。
不同蛋白(bái)大小(xiǎo)選擇不同的分離膠濃度,參考下(xià)表:
Laemmli系統
SDS-PAGE分離膠濃度
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最佳分離範圍(kD)
1×SDS-PAGE快速電(diàn)泳緩沖液
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最佳分離範圍(kD)
1×Tris-Glycine-SDS電(diàn)泳緩沖液
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6%
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25-300
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50-350
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8%
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10-250
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35-300
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10%
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5-150
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20-150
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12%
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3-100
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15-100
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15%
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低(dī)于60
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10-80
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4. 本快速電(diàn)泳液含有SDS,适用于變性膠蛋白(bái)電(diàn)泳,不适用于非變性電(diàn)泳(Native-PAGE)。
5.
該快速電(diàn)泳緩沖液建議用于經典Laemmli系統配制的凝膠,經測試可以達到(dào)最優的分離效果。對于其他電(diàn)泳系統如Bis-Tris系統,HEPES系統,Tris-醋酸系統,Tricine系統等,需要經過驗證測試後使用。
6. 本快速電(diàn)泳液可以适當回收,回收後的電(diàn)泳液可以作為(wèi)外槽電(diàn)泳液再使用1-2次。如果希望獲得最佳的電(diàn)泳效果,請勿使用回收的電(diàn)泳液。内槽緩沖液每次都需要使用新鮮配制的電(diàn)泳緩沖液。
● 使用說明:
1. 即用型1×SDS-PAGE快速電(diàn)泳緩沖液配制:
取1 L包裝的SDS-PAGE快速電(diàn)泳液(粉末裝),倒入到(dào)燒杯中,加入超純水(shuǐ)至總體積約為(wèi)900 ml,漩渦攪拌溶解,定容到(dào)1 L并混勻,即配成即用型1×SDS-PAGE快速電(diàn)泳液,溶液型緩沖液建議4℃貯存,可保存1-2周。
注:配制好的電(diàn)泳液放(fàng)置時間不宜超過兩周。如果出現變色或沉澱請重新配制新鮮的電(diàn)泳液。
2. 電(diàn)泳條件(jiàn):
電(diàn)壓建議為(wèi)150-200V。一(yī)般情況下(xià),恒壓200 V電(diàn)泳時,對于濃度為(wèi)10%的分離膠僅需20-25分鍾即可完成電(diàn)泳。如果需獲得更加平整和銳利的條帶,可以把電(diàn)壓調整為(wèi)100-150V,此時電(diàn)泳時間需要适當延長(cháng)。
● 實驗示例: