1×TBST粉末型
1×Tris-buffered Saline Tween（Power）
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産品編号
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産品名稱
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規格
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TB5070P
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1×TBST粉末型
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10×1L
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簡介：
TBST為(wèi)白(bái)色至類白(bái)色速溶顆粒，每袋TBS-T速溶顆粒可配制1L
1×
TBS-T緩沖液，操作簡便，使用方便。TBS-T的主要成分是氯化鈉、氯化鉀、Tris緩沖鹽和Tween-20，1×
TBST緩沖液中含有的氯化鈉濃度為(wèi)137
mM、氯化鉀的濃度為(wèi)2.7
mM，Tris緩沖鹽的濃度為(wèi)25
mM，Tween-20的含量為(wèi)0.05%。
TBST是一(yī)種在生(shēng)物(wù)學上(shàng)應用廣泛的緩沖液，主要用于免疫組化、原位雜(zá)交、酶聯免疫、免疫印迹實驗中，常用作洗滌緩沖液，也常用于抗體的稀釋以及封閉液的配制。
使用方法
1. 量取約600 ml的蒸餾水(shuǐ)加入燒杯，并放(fàng)置一(yī)個(gè)磁性攪拌子于燒杯中。
2. 将燒杯置于磁力攪拌器(qì)上(shàng)，慢(màn)慢(màn)加入1袋TBS-T速溶顆粒的全部内容物(wù)，攪拌溶液直至完全溶解。
3. 向步驟2的TBST溶液中加入蒸餾水(shuǐ)，定容至1 L，即為(wèi)1×。
保存條件(jiàn)：
常溫保存。
Western blot的洗液TBST是實驗室常用的配制液體，對于TBST的配方也基本上(shàng)相(xiàng)差不多(duō)，其中配方中就(jiù)有一(yī)種組分是Tween-20，一(yī)種黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。用移液槍吸取時會(huì)有一(yī)種滞後感。為(wèi)什麽在Western blot的洗液TBST中要加入這麽一(yī)種試劑，Tween-20在Western blot 中在發揮什麽樣的作用呢(ne)？
1、Tween-20
首先了解一(yī)下(xià)什麽是Tween-20。Tween-20也寫作Tween 20，也稱Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名為(wèi)吐溫-20或吐溫20。Tween-20為(wèi)黃色或琥珀色澄明的油狀液體，具有特殊的臭氣和微弱苦味。分子中含有較多(duō)的親水(shuǐ)性基團，可與水(shuǐ)、甲醇、乙醇、異丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。是常用的非離子性去垢劑。
2、Tween-20的應用
Tween-20是一(yī)種非離子型表面活性劑。用途為(wèi)水(shuǐ)包油乳化劑、可用作溶劑、擴散劑、穩定劑、潤滑劑和抗靜(jìng)電(diàn)劑等。氣相(xiàng)色譜固定液(最高(gāo)使用溫度120℃)分離分析揮發油、脂肪酸酯、醇、酮和鹵化物(wù)。
3、Tween-20作用
Western blot的操作流程中大部分都用到(dào)TBST洗液，而且還(hái)是封閉，一(yī)抗二抗孵育這種比較關鍵的步驟。通(tōng)常Tween-20作為(wèi)一(yī)種非離子型表面活性劑，效果和SDS、BSA作用差不多(duō)，主要是封閉膜上(shàng)蛋白(bái)的非結合位點，以降低(dī)背景，增強抗體的特異性結合。理想的封閉劑應該封閉所有未結合位點而不替換膜上(shàng)的靶蛋白(bái)、不結合靶蛋白(bái)的表位、也不與抗體或檢測試劑有交叉反應。如果脫脂牛奶封閉效果不好可以提高(gāo)吐溫濃度。
在WB洗液裡(lǐ)的吐溫是和BSA一(yī)樣，對抗原抗體蛋白(bái)提供保護作用，同時因為(wèi)是表面活性劑（司盤加成親水(shuǐ)的環氧乙烷基團後的化合物(wù)），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用于洗脫未結合的抗體、減少非特異性結合。Tween-20是我們用TBST的時候Tween-20得用量是0.5ml/L，不加SDS。