台盼藍染色液（Trypan Blue Staining Solution）

●     産品組成：

● 産品簡介：

台盼藍（Trypan Blue)或稱台盼蘭、錐蟲藍，是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率，是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一(yī)。正常的活細胞細胞膜結構完整，能(néng)夠排斥台盼藍，細胞不會(huì)被染成藍色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被台盼藍染成藍色。台盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小(xiǎo)體也有台盼藍拒染現象，因此台盼藍溶液不能(néng)區分凋亡細胞和死亡細胞。台盼藍染色後，通(tōng)過顯微鏡下(xià)直接計數或顯微鏡下(xià)拍照(zhào)後計數，就(jiù)可以對細胞存活率進行比較精确的定量。染色時間隻需 3-5 分鍾，操作簡單。

● 貯存：

4℃保存，一(yī)年(nián)有效。

● 操作步驟：

1.收集細胞：

對于貼壁細胞先用胰酶消化液消化細胞，用适量細胞重懸液（Hank’s液或生(shēng)理鹽水(shuǐ)）重懸細胞；對于懸浮細胞，1000-2000g離心1分鍾收集細胞，棄上(shàng)清，用适量細胞重懸液重懸細胞。

2.台盼藍染色：

吸取100微升重懸的細胞到(dào)1.5 ml離心管内，加入100微升台盼藍染色液，輕輕混勻，染色3分鍾  (染色3分鍾時間已經足夠，但染色時間可以更長(cháng)一(yī)些，但不宜超過10分鍾)。

3.計數：

  吸取少量經過染色的細胞，用血細胞計數闆計數。通(tōng)常如果要比較精确地進行定量，每個(gè)細胞樣品至少數500個(gè)細胞，數出藍色細胞和細胞總數。

細胞存活率＝(細胞總數－藍色細胞數)/細胞總數×100%

● 注意事(shì)項：

1. 染色時間不能(néng)太長(cháng)，否則活細胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顔色，使檢測結果偏低(dī)。

2. 為(wèi)了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一(yī)次性手套操作。

實驗示例：

Jurkat細胞台盼藍染色結果，深藍色細胞為(wèi)死細胞