5×TBE
5×Tris-Borate-EDTA Solution
産品編号
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産品名稱
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規格
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TB001
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5×TBE
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500 ml
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品名:5×TBE
簡介:
TBE 即 Tris-Borate-EDTA buffer ,5×TBE是 5 倍濃縮的 TBE,使用時需用蒸餾水(shuǐ)稀釋 5 倍後再使用,1×TBE工(gōng)作液中組份濃度:89 mM Tris-borate,2 mM EDTA,pH8.0。
TAE與TBE的區别:
1. TAE更适合于跑大片段,大于13 kb的片斷用TAE分離效果好。TBE更适合于跑小(xiǎo)片段,低(dī)于1 kb片段TBE效果更好。
2. TAE緩沖能(néng)力弱,需要經常更換,長(cháng)時間電(diàn)泳不可以選用。TBE有更強的緩沖能(néng)力,然而5×或10×TBE貯存容易出現沉澱。
3. 凝膠回收的話用TAE會(huì)更好,有文獻指出TBE中的硼酸影響回收效率,并且對回收後續連接反應有抑制作用。
保存及效期:
RT保存。有效期1年(nián)。
緩沖液TAE與TBE,哪個(gè)更好?
TAE和TBE緩沖液都可以用于DNA的瓊脂糖凝膠電(diàn)泳,兩者各有利弊,應根據實際情況選擇不同的緩沖液。
1×TAE 成分:40 mmol/L
Tris-乙酸;2 mmol/L EDTA。實驗室一(yī)般配成50×TAE。
優點:超螺旋在其中電(diàn)泳時更符合實際相(xiàng)對分子質量,質量電(diàn)泳大于13 kb 的片段時分離效果好,可用于回收DNA片段。貯存液可以配成50×的高(gāo)濃度,方便使用。
缺點:緩沖容量小(xiǎo),緩沖能(néng)力弱,長(cháng)時間電(diàn)泳(如過夜)不可選用。
1×TBE成分:45 mmol/L
Tris-硼酸;1 mmol/L EDTA。實驗室一(yī)般配成5×或10×TBE。
優點:緩沖能(néng)力強,适合較長(cháng)時間電(diàn)泳,分辨率較高(gāo),電(diàn)泳小(xiǎo)于1kb的片段時分離效果好。
缺點:緩沖液中的硼酸成分會(huì)影響 DNA 回收效率以及後續的酶反應實驗;貯存液容易沉澱析出。
1. 電(diàn)導率TBE>TAE。因此相(xiàng)比于TAE,TBE不太會(huì)導緻電(diàn)泳槽内過熱的情況發生(shēng),長(cháng)時間電(diàn)泳推薦使用TBE
2. 硼酸是酶的抑制劑,因此如果你需要分離電(diàn)泳的DNA用于酶切反應,建議使用TAE作為(wèi)電(diàn)泳緩沖溶液
3. TBE對于較小(xiǎo)片段的分離效果更好。對于小(xiǎo)于300bp的片段,在2%的瓊脂糖凝膠上(shàng),TBE中的遷移速度更快
4. TAE适用于大片段的分離,大于2kb的片段在TAE中的遷移速度更快(0.8%的瓊脂糖凝膠中),速度比在TBE中快出約10%。當片段大于13kb時,一(yī)般推薦使用TAE進行電(diàn)泳分離。
5. TAE更适用于回收DNA片段
6. 相(xiàng)比于TBE,TAE對于超螺旋的DNA分辨率更高(gāo)