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SYBR Green核酸染料(10000× in DMSO，電(diàn)泳級)

●  産品規格：

● 簡介：

SYBR Green是高(gāo)靈敏的DNA熒光(guāng)染料，适用于各種電(diàn)泳分析，操作簡單，至少可檢出20 pg DNA，高(gāo)于EB染色法25-100倍。SYBR Green 與dsDNA 結合熒光(guāng)信号會(huì)增強800-1000倍，用SYBR Green染色的凝膠樣品熒光(guāng)信号強，背景信号低(dī)，可适用于多(duō)種電(diàn)泳分析。

SYBR Green适合于多(duō)種凝膠電(diàn)泳方法：瓊脂糖凝膠，聚丙烯酰胺凝膠電(diàn)泳，脈沖電(diàn)場凝膠電(diàn)泳以及毛細管電(diàn)泳等。SYBR Green與雙鏈DNA的親和力非常高(gāo)，因此可以用做電(diàn)泳前染色，對分子生(shēng)物(wù)學中常用的酶（如：Taq 酶、逆轉錄酶、内切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用。另外，SYBR Green與EB相(xiàng)比，誘變能(néng)力大大降低(dī)。

● 貯存：4℃，避光(guāng)保存。

●  SYBR Green使用方法：

注意：染料使用前應在室溫下(xià)徹底融化混勻後使用。

SYBR Green後染方法（推薦方法）

1. 制作不含染料的凝膠，按照(zhào)常規方法進行電(diàn)泳。

2. 用pH 7.0 - 8.5 的緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照(zhào)10000：1的比例稀釋SYBR Green濃縮液（如50ml 1×TAE中加入5μl 染料），混勻，制成染色溶液。

3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器(qì)中，放(fàng)入凝膠，用鋁箔蓋住容器(qì)使染料避光(guāng)。室溫振蕩染色10-30分鍾，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上(shàng)染色，将配好的工(gōng)作溶液輕輕地倒在膠闆上(shàng)，讓工(gōng)作液均勻地覆蓋整個(gè)膠闆，并染色30分鍾。玻璃平皿必須預先經過矽烷化溶液處理（避免染料吸附在玻璃表面上(shàng)）。

4. 紫外燈下(xià)觀測。

SYBR Green預染方法

1. 制膠：按常規方法制備凝膠，凝膠溫度降至60℃左右時加入10000×SYBR，使染料終濃度為(wèi)1×，如40ml凝膠溶液中加入4μl染料。

2. 上(shàng)樣、電(diàn)泳後紫外燈下(xià)觀察。

● SYBR Green使用注意事(shì)項

1．後染方法是推薦方法，能(néng)得到(dào)更好的電(diàn)泳結果；由于SYBR對樣品過量非常敏感，預染方法容易出現條帶扭曲變形（建議泳道中每條帶的含量不要超過5ng），請根據實際情況摸索出适合自(zì)己的實驗程序，

2. SRBR對電(diàn)泳緩沖液的pH要求嚴格，有效pH為(wèi)7.5-8.0，電(diàn)泳時盡量使用新鮮配制的緩沖液，并保證合适的pH範圍。

3. SYBR Green 對玻璃和非聚丙烯材料具有一(yī)定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器(qì)。

4. 使用酒精沉澱核酸中，SYBR Green可以全部從(cóng)雙鏈核酸上(shàng)去掉。

5. 如果想對用 SYBR Green染過的膠進行 Southern blot，建議在預雜(zá)交和雜(zá)交溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS，可以有效去除SYBR。