植物(wù)凝膠(Phytagel)
●産品簡介:
Phytagel又(yòu)名Gellan gum,Gelrite。是一(yī)種瓊脂的替代物(wù),是細菌(假單孢菌Pseudomonas elodea)經過發酵生(shēng)産的,含有葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等物(wù)質,具有無色、透亮和高(gāo)韌性的特點,是配制植物(wù)組織培養基和微生(shēng)物(wù)培養基的主要成分。由于其克服了傳統瓊脂在植物(wù)組織培養中的固有缺陷為(wèi)植物(wù)學研究帶來了一(yī)場新的革命,已經成為(wèi)了國(guó)際公認的植物(wù)組培首選産品。
●常用工(gōng)作濃度:
植物(wù)培養基中1.5-2.5g/L;微生(shēng)物(wù)培養基中10g/L。
●優點:
1. 高(gāo)透明度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少:A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進生(shēng)長(cháng):It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意事(shì)項:
1. 植物(wù)凝膠不易溶解于冷水(shuǐ)中,滅菌前請搖勻。
2. 植物(wù)凝膠的凝固程度主要與三個(gè)因素有關:
a 離子強度:Phytagel的凝固需要陽離子尤其是二價陽離子的存在。一(yī)般植物(wù)培養基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓phytagel凝固。微生(shēng)物(wù)學研究所用的低(dī)鹽培養基中為(wèi)了使Phytagel凝固,通(tōng)常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或使用高(gāo)濃度的Phytagel。
b 培養基的pH值:pH5.8是其凝固的最适pH值,pH低(dī)于5.8不易凝固。由于高(gāo)壓滅菌會(huì)使培養基的pH降低(dī)0.3-0.5單位,因此滅菌前培養基的pH值要用MES和KOH調節到(dào)pH5.8,由于MES的緩沖能(néng)力,滅菌後不會(huì)使pH降低(dī)。建議MES 1升培養基中加0.5克(終濃度為(wèi)2.5 mM)
注:培養基中加入植物(wù)凝膠後,用KOH調節pH到(dào)5.8。避免先調節pH後加植物(wù)凝膠,因為(wèi)植物(wù)凝膠會(huì)影響培養基的pH。
c 凝膠用量:一(yī)般說來,對大多(duō)數植物(wù)培養基來說,1升培養基中凝膠用量3g(0.3%)足矣。特殊要求請适當調整凝膠用量。
附錄:植物(wù)凝膠與瓊脂使用對比
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[Ca2+]
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[Mg2+]
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Phytagel
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Agar
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pH
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MS培養基
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2.99mM
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1.50mM
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0.3%
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1%
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5.8
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1/2 MS培養基
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1.495mM
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0.75mM
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0.6%
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1%
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5.8
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細菌培養
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-
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-
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1%
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1.5%
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-
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Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.