DNase
I溶液（蛋白(bái)提取用）
DNase I
Solution（for protein isolation）
● 産品組成：
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貨号
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名稱
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規格
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RTT2103-01
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DNase I粉末
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10 KU
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RTT2103-02
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DNase I溶解液
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5 ml
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RTT2103-03
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1M MgCl2
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5 ml
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● 保存：-20℃粉末未配制有效期3年(nián)；DNaseI配制成溶液後-20℃有效期一(yī)年(nián)。
● 産品簡介：
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一(yī)種非特異性核酸酶切酶，可用于降解單鏈或雙鏈DNA，其原理為(wèi)DNaseⅠ水(shuǐ)解磷酸二酯鍵産生(shēng)帶有5'-磷酸基團和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。 本産品能(néng)迅速水(shuǐ)解核酸，降低(dī)粘度以減少處理時間和增加蛋白(bái)産量。該酶可以與細菌蛋白(bái)提取液和RIPA 裂解液等蛋白(bái)抽提試劑配合使用。
本産品RNase活性未檢測，不能(néng)用于反轉錄反應（RT-PCR）中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請選擇RNase-free DNase
I（貨号：RTT2014）。
● 活性定義：
One unit of the enzyme
completely degrades 1 μg of DNA in 10 min at37°C.
● DNaseI溶解液組份：
20
mMsodium acetate pH 6.5, containing5 mMCaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol
● DNaseI失活或抑制：
加入EDTA至終濃度為(wèi)2.5mM後，65℃加熱10分鍾可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達到(dào)毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等還(hái)原劑，50-100mM以上(shàng)鹽濃度均對DNase I有顯著抑制作用。
● 使用方法：
1、DNase I溶液的配制：取5ml DNase I溶解液全部加到(dào)DNase I粉末中，充分混勻，配成濃度為(wèi)2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。
2、蛋白(bái)提取液中按照(zhào)1/100 體積加入DNase I溶液（使其終濃度為(wèi)20U/ml），1/100體積加入1MMgCl2，37℃處理30-60分鍾。
注：由于EDTA能(néng)螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白(bái)初始裂解液中要去除EDTA，否則會(huì)降低(dī)DNase的消化能(néng)力。
3、繼續後續蛋白(bái)提取實驗。