單鏈DNA PAGE電(diàn)泳染色試劑盒
産品編号
|
規格
|
運輸
|
RTS5103
|
20次
|
常溫
|
● 産品簡介
單鏈DNA PAGE電(diàn)泳染色試劑盒(ssDNA PAGE Stain Kit for Nucleic Acids)是一(yī)種快速簡單、可用于尿素-聚丙烯酰胺凝膠中的核酸檢測的試劑盒。采用新型染色劑,電(diàn)泳結束後可以直接染色凝膠,不用借助任何成像儀器(qì),既能(néng)觀察核酸條帶。該方法能(néng)檢測到(dào)下(xià)限10ng的 ssDNA條帶,常用于檢測 SSR 标記、SNP 标記等。
按照(zhào)每次使用50 ml染色液計算(suàn),本試劑盒可用于18-20塊常規的8×10cm凝膠的染色。
● 産品組成:
産品編号
|
産品名稱
|
規格
|
貯存
|
RTS5103-1
|
染色貯存液(10×)
|
100 ml
|
常溫
|
RTS5103-2
|
染色緩沖液(5×)
|
250 ml
|
常溫
|
-
|
125ml棕色塑料瓶(空)
|
-
|
|
● 儲存條件(jiàn)
常溫保存;常溫運輸,開(kāi)封後一(yī)年(nián)有效。
● 使用方法:
一(yī). 即用型染色液配制:
在125 ml棕色塑料瓶中依次加入以下(xià)組份,混勻;即用型染色液常溫貯存。
順序
|
組份
|
50 ml
|
1
|
染色貯存液(10×)
|
5
ml
|
2
|
超純水(shuǐ)
|
35
ml
|
3
|
染色緩沖液(5×)
|
10
ml
|
二. 染色步驟:
1. ssDNA PAGE電(diàn)泳後,凝膠用蒸餾水(shuǐ)漂洗1-2次。
2. 加入适量即用型染色液覆蓋凝膠,一(yī)般8×10cm凝膠50 ml即可,在搖床上(shàng)常溫搖動15-20分鍾,搖動速度為(wèi)60-70rpm。一(yī)般2-5分鍾可以看(kàn)到(dào)條帶。
三. 脫色步驟:
倒掉染色液,加入适量蒸餾水(shuǐ),在搖床上(shàng)常溫搖動15-20分鍾,期間可以更換2-3次蒸餾水(shuǐ);至凝膠背景透明後記錄圖片。
注:1. 染色時間不要太長(cháng),更不能(néng)過夜染色。長(cháng)時間染色會(huì)導緻ssDNA遊離出凝膠,導緻膠上(shàng)無帶。
2. 使用後的染色液收集後,可以重複使用2-3次
● 實驗示例:
● 常見(jiàn)問題:
1.
背景太深:
a. 顯色時間過長(cháng)。通(tōng)常凝膠在染色液裡(lǐ)2-5分鍾既能(néng)看(kàn)到(dào)條帶,顯色反應會(huì)在20分鍾内結束,顯色反應時間過長(cháng)會(huì)藍色背景很深。
2. 核酸條帶非常淺:
a. 上(shàng)樣量太少。 該染色方法可以檢測到(dào)10
ng 單鏈DNA片段,請控制核酸上(shàng)樣量。
3. 染色方法适合于雙鏈DNA染色嗎(ma)?
不适合。雙鏈DNA的分離一(yī)般用非變性DNA PAGE電(diàn)泳,該染色液不能(néng)有效染色。