RealCarrier核酸助沉劑

 RealCarrier Nucleic Acid Precipitation Solution  

●    産品貨号及規格：

● 産品簡介：

RealCarrier核酸助沉劑是幫助核酸在乙醇中沉澱的一(yī)種非動物(wù)源性的核酸沉澱專用試劑。乙醇低(dī)溫沉澱是回收液體樣品中DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉澱并不能(néng)完全回收樣品中的核酸，特别是在回收微量(＜5ng/μl)或者低(dī)片段(＜200bp)核酸時，損失更為(wèi)嚴重(有數據表明，單獨的乙醇沉澱隻能(néng)回收50%的此類DNA和RNA)。RealCarrier核酸助沉劑是一(yī)種分子生(shēng)物(wù)學級的非動物(wù)源性的多(duō)聚物(wù)溶液，在乙醇沉澱時加入4-6 μl RealCarrier核酸助沉劑即可明顯提高(gāo)核酸沉澱的得率，可使痕量DNA(＜5ng/μl)的回收率達到(dào)95-98%，同時可選擇性去除短引物(wù)(<20bp)片段和dNTP。與生(shēng)物(wù)源性的核酸沉澱助劑如糖原（有文獻報(bào)道，糖原影響DNA-蛋白(bái)質的相(xiàng)互作用）和tRNA相(xiàng)比（tRNA會(huì)影響多(duō)聚核苷酸激酶對DNA的磷酸化），RealCarrier核酸助沉劑本身無核酸污染也無DNA酶和RNA酶活性，同時不影響酶切、連接、轉錄、PCR、轉化轉染等。RealCarrier核酸助沉劑已成為(wèi)最常用的核酸助沉劑。

按照(zhào)400 μl核酸樣品使用5 μl RealCarrier核酸助沉劑計算(suàn)，該産品可以至少使用400次。

● 貯存：

4℃貯存。有效期二年(nián)。

●    使用說明：

1. 按照(zhào)下(xià)表，在1.5ml離心管中依次加入DNA樣品，0.1倍樣品體積3MNaAc pH5.2，5μl RealCarrier，2.5倍樣品體積無水(shuǐ)乙醇，混合均勻；當樣品體積大于400 μl時，可按每100 μl加入1μl RealCarrier的比例增加使用量，如700μl樣品，加8μl RealCarrier。

注：a 待回收的核酸樣品濃度要在10 pg/μl至100 ng/μl之間。過高(gāo)濃度的樣品使用本産品會(huì)降低(dī)回收效率，高(gāo)于300 ng/μl的樣品不要使用本産品，可以直接使用經典的乙醇沉澱方法回收。

b 加入RealCarrier核酸助沉劑後無需低(dī)溫孵育，低(dī)溫孵育反而會(huì)降低(dī)回收效率。混勻後請直

接進行離心步驟。

2. 12000rpm 常溫離心10分鍾。

3. 棄上(shàng)清，加入1ml 70%乙醇漂洗沉澱；12000rpm 常溫離心5分鍾。

4. 棄上(shàng)清，快甩離心，用10 μl微量移液器(qì)徹底吸棄殘餘乙醇，常溫開(kāi)蓋幹燥1-2分鍾幹燥沉澱。

  注：幹燥時間不要過久，過分幹燥的核酸樣品不易溶解；幹燥時間也不能(néng)過短，殘餘的乙醇會(huì)影響核酸樣品的後續操作，如抑制内切酶的活性。

5 沉澱溶解于1×TE或超純水(shuǐ)中，-20℃保存。