PCR産物(wù)純化試劑盒（目錄号：RTP2202）

試劑盒内容及保存：

儲存條件(jiàn)：

本試劑盒在室溫（15–25℃）幹燥條件(jiàn)下(xià)，可保存12個(gè)月(yuè)；更長(cháng)時間的保存可置于2–8℃。（注意：當低(dī)溫貯存時，使用前應先将試劑盒内的溶液在室溫中放(fàng)置一(yī)段時間，必要時可在37℃水(shuǐ)浴中預熱10-20分鍾，以平衡溶液溫度。）

産品簡介：

本試劑盒采用離心吸附柱結合獨特的緩沖液系統，從(cóng)酶切、PCR等反應溶液中純化DNA片段，同時除去蛋白(bái)質、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物(wù)等雜(zá)質。使用本試劑盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率為(wèi)30－50 %）。

每個(gè)吸附柱每次最多(duō)可吸附的DNA量約為(wèi)10 μg。

使用本試劑盒回收的DNA可适用于各種常規操作，包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。

産品特點：

1 結合液PB為(wèi)亮黃色，便于觀察體系的pH是否合适。

2 操作快捷，單個(gè)樣品操作少于10分鍾。

操作步驟：

如非指出，所有離心步驟均為(wèi)使用台式離心機(jī)在室溫下(xià)離心。

1 在PCR反應液中直接加入5倍體積的PB液，颠倒混勻後，全部加入到(dào)吸附柱CA2中，10,000g離心30-60秒(miǎo)，到(dào)掉收集管中的廢液，将吸附柱CA2重新放(fàng)入收集管中。

注：● 如果PCR反應體系使用了石蠟油，無需去除，但要使用10倍體積的PB液。

● 如果反應體系小(xiǎo)于50μl，用水(shuǐ)補至50μl體系，再加入PB液。

● 如果體系體積大于700μl，請分次上(shàng)柱，保證全部溶液均加入到(dào)吸附柱中。

2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水(shuǐ)乙醇），10,000g離心30-60秒(miǎo)，倒掉廢液，将吸附柱重新放(fàng)入收集管中。

3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10,000g離心30-60秒(miǎo)，倒掉廢液。

4 将離心吸附柱CA2放(fàng)回收集管中，10,000g離心2分鍾，盡量除去漂洗液。

注意：此步必不可少！如果漂洗液有殘留，将會(huì)影響回收效率和DNA質量，進而影響下(xià)遊實驗；離心後将吸附柱蓋子打開(kāi)，室溫放(fàng)置2分鍾，這樣将有助于徹底揮發殘餘乙醇。

5 将吸附柱放(fàng)到(dào)一(yī)個(gè)幹淨離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加适量洗脫緩沖液EB，室溫放(fàng)置2分鍾。10,000g離心2分鍾收集DNA溶液。

注意：

● 可将洗脫緩沖液EB預熱到(dào)60-70℃後再加到(dào)吸附膜上(shàng)，這樣可以提高(gāo)洗脫效率。

● CA2柱的洗脫體積不應少于20 μl，體積過小(xiǎo)将會(huì)降低(dī)回收效率。

● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水(shuǐ)做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5範圍内，pH值低(dī)于7.0會(huì)降低(dī)洗脫效率

6 DNA産物(wù)-20℃保存。