細菌蛋白(bái)提取試劑盒（100次）  貨号：RTD8101

● 産品組份及規格

● 産品簡介

細菌蛋白(bái)提取試劑盒使用溫和的非離子型去污劑，适用于大腸杆菌表達的重組蛋白(bái)提取。提取過程中不需進行超聲破碎等複雜(zá)的操作步驟，有效避免了外源蛋白(bái)的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎上(shàng)添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白(bái)酶抑制劑PMSF，可提高(gāo)蛋白(bái)提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現象，有效避免蛋白(bái)降解。所提取的蛋白(bái)保持了生(shēng)物(wù)學活性，可進行IP、Western blot實驗；提取體系中不含EDTA，可直接通(tōng)過Ni-NTA 等純化填料進行蛋白(bái)純化。該試劑盒既可适用于小(xiǎo)量蛋白(bái)表達檢測，也适用于大量蛋白(bái)的表達純化試驗。

每次提取使用1ml 緩沖液計算(suàn)，該試劑盒可以使用100次。

●    貯存條件(jiàn)：

試劑組份按照(zhào)溫度貯存，可保存 12個(gè)月(yuè)。

●    使用方法：

1. 8,000 rpm常溫離心 3 min 後，棄上(shàng)清，盡量棄除殘餘培養基，留取管底部菌體。

2. 即用型提取緩沖液配制：每ml 提取緩沖液中加入10 μl PMSF，10 μl 溶菌酶，1 μl DNase I，混勻後4℃貯存備用。注：該緩沖液現用現配，不建議貯存。

3. 按照(zhào)原菌液1/2-1/5體積加入即用型提取緩沖液，即2-5 ml菌液收集的菌體加入1 ml 提取緩沖液，用吸頭吹打至無可見(jiàn)細胞團塊，重懸菌體。

4. 20-37℃孵育 15-20 min，期間輕彈離心管數次以加速裂解。

注：若蛋白(bái)表達量較低(dī)，建議結合超聲破碎，置冰上(shàng)後，采用300w，10s 超聲/10s 間隔，超聲20min，至菌液變清亮。

5. 裂解完成後 13,000rpm4℃離心5 min，将上(shàng)清（上(shàng)清中即為(wèi)可溶性蛋白(bái)）轉移至新的離心管中，直接進行下(xià)一(yī)步純化或檢測實驗。

6. 蛋白(bái)提取物(wù)分裝後建議-80℃保存。

實驗示例：