快速蛋白(bái)銅染試劑盒

● 産品簡介：                                                    

本試劑采用以銅離子為(wèi)基礎的負染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE電(diàn)泳凝膠染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，實驗方便快速，可以在30 min左右完成，最低(dī)能(néng)夠檢測出2 ng的蛋白(bái)條帶，該方法不對蛋白(bái)質産生(shēng)修飾作用，而且經過脫色液處理後，可以用于電(diàn)洗脫或采用PAGE膠蛋白(bái)微量回收試劑盒（貨号：RTD8108）進行膠回收，以便進行質譜和測序分析等，也可以用于電(diàn)轉移或用其他染色方法（銀(yín)染或考染）對膠重新染色。

按照(zhào)每次使用50 ml1×即用型染色液計算(suàn)，本産品可以染色 8-10塊mini-PAGE（8×10cm）膠。

● 産品組成：

● 儲存條件(jiàn)

按照(zhào)标簽溫度貯存，常溫運輸。開(kāi)封後一(yī)年(nián)有效。

● 凝膠染色的操作步驟：

以下(xià)步驟以一(yī)塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為(wèi)例。

一(yī). 漂洗：

取出電(diàn)泳後的 PAGE 凝膠，用超純水(shuǐ)漂洗兩次，每次1分鍾。

二. 前處理：

2.1 準備工(gōng)作：将增強液（4×）用超純水(shuǐ)稀釋4倍，配成1×增強液。

2.2 凝膠中加入50 ml 1×增強液，常溫搖床慢(màn)搖10分鍾。

三. 漂洗：

棄增強液，用超純水(shuǐ)漂洗凝膠兩次，每次10-20秒(miǎo)，至泡沫完全清除幹淨。

注：漂洗時間不要太長(cháng)，否則會(huì)導緻染色效果下(xià)降。

四. 染色：

4.1 準備工(gōng)作：将染色液（10×）用超純水(shuǐ)稀釋10倍，配成1×即用型染色液。

    注：染色液略成半渾濁狀态。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型染色液，搖床慢(màn)搖5-10分鍾，觀察結果：在黑(hēi)色背景下(xià)，可見(jiàn)光(guāng)觀察，蛋白(bái)條帶為(wèi)棕褐色，無蛋白(bái)區域為(wèi)藍綠色；可見(jiàn)光(guāng)燈箱觀察（凝膠底部打光(guāng)），蛋白(bái)質條帶反顯白(bái)色，無蛋白(bái)的膠區則為(wèi)黃綠色。

五. 漂洗：

棄染色液，超純水(shuǐ)洗滌凝膠2次，每次搖床慢(màn)搖1分鍾。

注：凝膠可以在水(shuǐ)中保存1-2周。

六. 脫色：

6.1 準備工(gōng)作：将脫色液（10×）用超純水(shuǐ)稀釋10倍，配成1×即用型脫色液。

6.2 如需要進行蛋白(bái)切膠回收，将所需的蛋白(bái)質條帶切下(xià)，用超純水(shuǐ)漂洗切下(xià)的凝膠一(yī)次；如凝膠需要考染，銀(yín)染或轉膜實驗，直接用超純水(shuǐ)漂洗整個(gè)凝膠一(yī)次。

6.3 棄水(shuǐ)，凝膠中加入适量1×即用型脫色液覆蓋凝膠，搖床慢(màn)搖5分鍾，倒掉脫色液；

6.4 重複脫色步驟2次。脫色完全的标志(zhì)是白(bái)色凝膠完全脫色為(wèi)無色透明。

6.5 超純水(shuǐ)漂洗凝膠兩次，進行後續實驗操作。

實驗示例：

4-20% RealPAGE Precast Gel