快速蛋白(bái)鋅染試劑盒

● 産品組成：                                                        Ver.720359

● 産品簡介：                                                   

本試劑采用以鋅離子為(wèi)基礎的負染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE電(diàn)泳凝膠染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，實驗方便快速，可以在30 min左右完成，最低(dī)能(néng)夠檢測出2 ng的蛋白(bái)條帶，該方法不對蛋白(bái)質産生(shēng)修飾作用，而且經過脫色液處理後，可以用于電(diàn)洗脫或采用PAGE膠蛋白(bái)微量回收試劑盒（貨号：RTD8108）進行膠回收，以便進行質譜和測序分析等，也可以用于電(diàn)轉移或用其他染色方法（銀(yín)染或考染）對膠重新染色。

按照(zhào)每次使用50 ml1×即用型染色液計算(suàn)，本産品可以染色 8-10塊mini-PAGE（8×10cm）膠。

● 儲存條件(jiàn)

按照(zhào)标簽溫度貯存，常溫運輸。開(kāi)封後一(yī)年(nián)有效。

● 凝膠染色的操作步驟：

以下(xià)步驟以一(yī)塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為(wèi)例。

一(yī). 漂洗：

取出電(diàn)泳後的 PAGE 凝膠，用超純水(shuǐ)漂洗兩次，每次1分鍾。

二. 染色：

2.1 準備1×即用型染色液：

2.1凝膠染色：

凝膠中加入50 ml 1×即用型染色液，常溫搖床慢(màn)搖10分鍾。

注：增強液(100×)在低(dī)溫條件(jiàn)下(xià)會(huì)産生(shēng)白(bái)色沉澱，請在使用前60℃水(shuǐ)浴中加熱，震蕩至完全溶解後使用。

三. 漂洗：

棄染色液，用超純水(shuǐ)漂洗凝膠兩次，每次1分鍾，至泡沫完全清除幹淨。

四. 顯色：

4.1 準備工(gōng)作：将顯色液（10×）用超純水(shuǐ)稀釋10倍，配成1×即用型顯色液。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型顯色液中，搖床慢(màn)搖30-60秒(miǎo)。觀察結果：在黑(hēi)色背景下(xià)，可見(jiàn)光(guāng)觀察，蛋白(bái)條帶為(wèi)棕褐色，無蛋白(bái)區域為(wèi)類白(bái)色；可見(jiàn)光(guāng)燈箱觀察（凝膠底部打光(guāng)），蛋白(bái)質條帶反顯白(bái)色，無蛋白(bái)的膠區則為(wèi)白(bái)色。

五. 漂洗：

棄顯影液，超純水(shuǐ)洗滌凝膠2次，每次搖床慢(màn)搖1分鍾。

注：凝膠可以在水(shuǐ)中保存1-2周。

六. 脫色：

6.1 準備工(gōng)作：将脫色液（10×）用超純水(shuǐ)稀釋10倍，配成1×即用型脫色液。

6.2 如需要進行蛋白(bái)切膠回收，将所需的蛋白(bái)質條帶切下(xià)，用超純水(shuǐ)漂洗切下(xià)的凝膠一(yī)次；如凝膠需要考染，銀(yín)染或轉膜實驗，直接用超純水(shuǐ)漂洗整個(gè)凝膠一(yī)次。

6.3 棄水(shuǐ)，凝膠中加入适量1×即用型脫色液覆蓋凝膠，搖床慢(màn)搖5分鍾，倒掉脫色液；

6.4 重複脫色步驟2次。脫色完全的标志(zhì)是白(bái)色凝膠完全脫色為(wèi)無色透明。

6.5 超純水(shuǐ)漂洗凝膠兩次，進行後續實驗操作。

●  實驗示例：

             4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-4: BSA 10μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 5: Bacterial Lysis
凝膠顯影後(脫色前)蛋白(bái)條帶在黑(hēi)色背景下(xià)為(wèi)棕褐色
可見(jiàn)光(guāng)燈箱觀察（凝膠底部打光(guāng)），蛋白(bái)質條帶反顯白(bái)色