考馬斯亮藍脫色液(常規法)

● 儲存條件(jiàn)

常溫保存，開(kāi)封後一(yī)年(nián)有效。

● 産品簡介

考馬斯亮藍脫色液(Commassie Blue Staining Destaining Solution)是用于蛋白(bái)凝膠考馬斯亮藍染色後凝膠的脫色。本脫色液可以和考馬斯亮藍染色液(RTD6203)配套使用。使用本脫色液進行脫色，采用常規脫色方法至少脫色1小(xiǎo)時可以觀察到(dào)蛋白(bái)條帶；采用快速脫色方法不足20分鍾即可觀察到(dào)蛋白(bái)條帶。觀察到(dào)最清晰的蛋白(bái)條帶則需脫色更長(cháng)時間。

本脫色液經過改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。

● 使用說明：

一(yī).  常規染色脫色方法：

1.  電(diàn)泳結束後，取凝膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中，确保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2.  置于水(shuǐ)平搖床或側擺搖床上(shàng)緩慢(màn)搖動，室溫染色1小(xiǎo)時或更長(cháng)時間。

    注：具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚，溫度較低(dī)，則染色時間宜适當延長(cháng)。凝膠較薄，溫度較高(gāo)，則染色時間可以适當縮短。通(tōng)常染色至凝膠的顔色和染色液的顔色非常接近，在染色液中幾乎看(kàn)不清凝膠時，可以認為(wèi)已染色充分。染色2-4個(gè)小(xiǎo)時或更長(cháng)時間不會(huì)對最終的染色效果産生(shēng)負面影響。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液，确保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

    注：脫色液可以使用考馬斯亮藍脫色液(RTD6204)；如果希望自(zì)行配制，推薦的脫色液配方為(wèi)：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水(shuǐ)。

5.  置于水(shuǐ)平搖床或側擺搖床上(shàng)緩慢(màn)搖動，室溫脫色4-24小(xiǎo)時。期間更換脫色液2-4次，直至藍色背景基本上(shàng)全部被脫去，并且蛋白(bái)條帶染色效果達到(dào)預期。通(tōng)常蛋白(bái)條帶在脫色1-2小(xiǎo)時後即可出現。

注：脫色期間可以在脫色液中加入一(yī)片吸水(shuǐ)紙(zhǐ)，可以使部分染料吸附在吸水(shuǐ)紙(zhǐ)上(shàng)，加快脫色。脫色時間過長(cháng)也會(huì)導緻蛋白(bái)條帶的顔色變淺。

6． 完成脫色後，可以把凝膠保存在水(shuǐ)中，用于後續的拍照(zhào)等。保存在水(shuǐ)中的凝膠會(huì)發生(shēng)溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油的水(shuǐ)中。長(cháng)期保存可以制備幹膠。

二.  快速染色脫色方法：

1.  電(diàn)泳結束後，取膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。通(tōng)常對于膠濃度大于10％的膠比較堅韌，在發生(shēng)煮沸時不易破損；對于膠濃度小(xiǎo)于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現膠碎裂的情況。

2.  随後在染色液溫度較高(gāo)的情況下(xià)，在室溫搖床上(shàng)搖動5-10分鍾。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液，确保染色液可以充分覆蓋凝膠。

   注：脫色液可以使用考馬斯亮藍染色脫色液(RTD6204)；如果希望自(zì)行配制，推薦的脫色液配方為(wèi)：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水(shuǐ)。

5.  微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。

6.  随後在脫色液溫度較高(gāo)的情況下(xià)，在搖床上(shàng)搖動5-10分鍾。此時通(tōng)常可以觀察到(dào)比較清楚的蛋白(bái)條帶。

7.  更換新鮮的脫色液，重複步驟5和步驟6，直至藍色背景基本上(shàng)全部被脫去，蛋白(bái)條帶染色效果達到(dào)預期。

8.  完成脫色後，可以把凝膠保存在水(shuǐ)中，用于後續的拍照(zhào)等。保存在水(shuǐ)中的凝膠會(huì)發生(shēng)溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油的水(shuǐ)中。長(cháng)期保存可以制備幹膠。