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考馬斯亮藍蛋白(bái)染色液 常規法

考馬斯亮藍蛋白(bái)染色液 常規法

産品編号:RTD6203

産品規格:250ml

數量
價格 ¥100

考馬斯亮藍染色液(常規法)

産品編号

規格

貯存

RTD6203

250ml

常溫

儲存條件(jiàn)

常溫保存,開(kāi)封後一(yī)年(nián)有效。

産品簡介

考馬斯亮藍染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍G-250為(wèi)主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非變性PAGE膠(native gel)的染色。采用常規染色方法需至少1小(xiǎo)時可以完成染色;采用快速染色方法數分鍾即可完成染色。本染色液經過改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸。

使用說明:

一(yī)常規染色脫色方法

1.  電(diàn)泳結束後,取凝膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中,确保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2.  置于水(shuǐ)平搖床或側擺搖床上(shàng)緩慢(màn)搖動,室溫染色1小(xiǎo)時或更長(cháng)時間。

    注:具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚,溫度較低(dī),則染色時間宜适當延長(cháng)。凝膠較薄,溫度較高(gāo),則染色時間可以适當縮短。通(tōng)常染色至凝膠的顔色和染色液的顔色非常接近,在染色液中幾乎看(kàn)不清凝膠時,可以認為(wèi)已染色充分。染色2-4個(gè)小(xiǎo)時或更長(cháng)時間不會(huì)對最終的染色效果産生(shēng)負面影響。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液,确保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

    注:脫色液可以使用考馬斯亮藍脫色液(RTD6204);如果希望自(zì)行配制,推薦的脫色液配方為(wèi):40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水(shuǐ)。

5.  置于水(shuǐ)平搖床或側擺搖床上(shàng)緩慢(màn)搖動,室溫脫色4-24小(xiǎo)時。期間更換脫色液2-4次,直至藍色背景基本上(shàng)全部被脫去,并且蛋白(bái)條帶染色效果達到(dào)預期。通(tōng)常蛋白(bái)條帶在脫色1-2小(xiǎo)時後即可出現。

注:脫色期間可以在脫色液中加入一(yī)片吸水(shuǐ)紙(zhǐ),可以使部分染料吸附在吸水(shuǐ)紙(zhǐ)上(shàng),加快脫色。脫色時間過長(cháng)也會(huì)導緻蛋白(bái)條帶的顔色變淺。

6. 完成脫色後,可以把凝膠保存在水(shuǐ)中,用于後續的拍照(zhào)等。保存在水(shuǐ)中的凝膠會(huì)發生(shēng)溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水(shuǐ)中。長(cháng)期保存可以制備幹膠。

快速染色脫色方法

1.  電(diàn)泳結束後,取膠放(fàng)入适量考馬斯亮藍染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通(tōng)常對于膠濃度大于10%的膠比較堅韌,在發生(shēng)煮沸時不易破損;對于膠濃度小(xiǎo)于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現膠碎裂的情況。

2.  随後在染色液溫度較高(gāo)的情況下(xià),在室溫搖床上(shàng)搖動5-10分鍾。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重複使用至少2-3次。

4.  加入适量脫色液,确保染色液可以充分覆蓋凝膠。

   注:脫色液可以使用考馬斯亮藍染色脫色液(RTD6204);如果希望自(zì)行配制,推薦的脫色液配方為(wèi):40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水(shuǐ)。

5.  微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。

6.  随後在脫色液溫度較高(gāo)的情況下(xià),在搖床上(shàng)搖動5-10分鍾。此時通(tōng)常可以觀察到(dào)比較清楚的蛋白(bái)條帶。

7.  更換新鮮的脫色液,重複步驟5和步驟6,直至藍色背景基本上(shàng)全部被脫去,蛋白(bái)條帶染色效果達到(dào)預期。

8.  完成脫色後,可以把凝膠保存在水(shuǐ)中,用于後續的拍照(zhào)等。保存在水(shuǐ)中的凝膠會(huì)發生(shēng)溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水(shuǐ)中。長(cháng)期保存可以制備幹膠。  


 
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