PCR染料添加劑(10×)
● 儲存和運輸:-20℃保存;常溫運輸
● 貨号:RTC3106
● 産品包裝:
5×1.5 ml
● 産品簡介
PCR染料添加劑為(wèi)含有紅(hóng)色染料和助沉劑的混合物(wù),按照(zhào)10倍體積稀釋于PCR反應體系中,PCR結束後可以直接上(shàng)樣電(diàn)泳,不用再與loading buffer混合,方便快捷。特有的紅(hóng)色染料不會(huì)影響Taq酶活性,電(diàn)泳時指示前沿為(wèi)紅(hóng)色。
● 反應舉例:
注意:以下(xià)舉例為(wèi)常規PCR反應系統,僅供參考。實際反應條件(jiàn)因模闆、引物(wù)等的結構不同而各異,需根據模闆、目的片段的大小(xiǎo)、堿基序列和引物(wù)長(cháng)短等具體情況,設定最佳反應條件(jiàn)。
以人基因組DNA為(wèi)模闆,擴增1 kb的片段
1. 反應體系的建立:50μl反應體系如下(xià)(可根據比例放(fàng)大或縮小(xiǎo)反應體系):
Template
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<1mg
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Primer 1(10 mM)
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1 ml
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Primer 2(10 mM)
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1 ml
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10×Taq Buffer
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5 ml
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dNTP
Mixture(10 mM)
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1 ml
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Taq (5 U/ml)
PCR染料添加劑(10×)
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0.5 ml
5
μl
水(shuǐ)至50μl
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2.
PCR反應循環的設置:
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃5 min
3.
結果檢測:反應結束後取5μl反應産物(wù),瓊脂糖凝膠電(diàn)泳檢測。
注:紅(hóng)色指示染料電(diàn)泳中的遷移速度略快于溴酚藍。