産品編号:RTC3105
産品規格:20次
PCR反應試劑盒 ( 2000bp )
貨号:RTC3105
● 簡介:
本試劑盒包含完成PCR反應所需全部試劑,可進行PCR實驗的教學和科研。其中模闆為(wèi)質粒DNA;引物(wù)為(wèi)根據質粒DNA序列設計的上(shàng)、下(xià)遊引物(wù);2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優化劑以及穩定劑。使用時,隻需補加實驗所需的引物(wù)和模闆後即可進行PCR反應,可最大限度的減少人為(wèi)誤差,具有快速簡便、穩定性好等優點。使用本試劑盒進行PCR反應後,PCR産物(wù)大小(xiǎo)應為(wèi)2000bp。
● 貯存:-20℃。有效期一(yī)年(nián)。
● 包裝:20次
● 試劑盒組成:
組成
濃度
體積
模闆
10 ng/μl
30 μl
上(shàng)遊引物(wù)(2000 FW)
10 μM
下(xià)遊引物(wù)(2000 RV)
2×Taq PCR MasterMix(含染料)
-
2×500 μl
去離子水(shuǐ)
1 ml
● 實驗步驟:
1. 冰浴中徹底融化模闆,引物(wù)和2×Taq PCR MasterMix,混勻後快甩離心将溶液收集到(dào)管底。
2. 按照(zhào)下(xià)表在0.2ml PCR管中制備反應體系:
50μl反應體系
上(shàng)遊引物(wù)(2000FW) 10μM
1 μl
下(xià)遊引物(wù)(2000RV) 10μM
2×Taq PCR MasterMix
25 μl
水(shuǐ)
22 μl
3. 快甩離心将反應液收集到(dào)管底。
4. PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話,補加25μl礦物(wù)油。
5. PCR儀上(shàng)執行以下(xià)程序:
步驟
溫度
時間
循環數
初始變性
94℃
5 min
1
變性
30 sec
30
退火
54℃
延伸
72℃
2 min
最後延伸
6. 反應完成後,取5ml反應液,1%瓊脂糖凝膠電(diàn)泳,觀察條帶情況。