快速半幹轉轉印試劑盒
Rapid Semi-Dry Transfer Blot Kit Ver740158
貨号
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名稱
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規格
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RT5040
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快速半幹轉轉印試劑盒
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20次
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● 産品組成:
貨号
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名稱
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規格
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貯存
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RT5030
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5×RealBlot快速半幹轉轉膜緩沖液
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500 ml
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4℃
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SP1010
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半幹轉轉印濾布
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20張/包
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RT
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ML-NC-152045-5
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NC膜
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5張/包
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RT
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RTD6301
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麗春紅(hóng)染色液
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100 ml
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RT
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說明書
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一(yī)份
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● 産品簡介:
快速半幹轉轉印試劑盒使用半幹轉法(Semi-dry blot)方法,配套快速半幹轉儀器(qì)能(néng)在10-15分鍾内高(gāo)效快速地将蛋白(bái)轉移到(dào)印迹膜(NC膜)上(shàng)。
特點:
環境友(yǒu)好:快速轉膜液不使用甲醇,減輕了對實驗者和環境的傷害。
兼容性好:快速轉膜液能(néng)兼容Laemmli膠,預制膠,Bis-Tris膠等多(duō)種凝膠。
節省時間:快速轉膜液能(néng)在10-15分鍾内完成蛋白(bái)的轉印。
以每次轉印使用200 ml 1×RealBlot快速半幹轉轉膜緩沖液計算(suàn),該産品可以至少使用20次。
● 貯存及運輸:
按照(zhào)标簽溫度貯存;有效期一(yī)年(nián);常溫運輸。
● 使用說明:
1 按照(zhào)下(xià)表配制1×RealBlot快速半幹轉轉膜緩沖液:
加入順序
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組份
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1×快速轉膜液配制量 200ml
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1
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5×快速轉膜液
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40 ml
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2
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超純水(shuǐ)
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120 ml
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3
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無水(shuǐ)乙醇
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40 ml
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注:按照(zhào)順序加入各種溶液。如果加入轉膜液後沒有用水(shuǐ)沖洗稱量容器(qì),加入乙醇會(huì)産生(shēng)沉澱。
2 将濾布浸泡在1×快速轉膜液中,完全浸濕3-5分鍾。
3 根據凝膠大小(xiǎo)将NC膜裁剪到(dào)凝膠近似大小(xiǎo),完全浸泡在轉膜緩沖液中。
4 将凝膠在超純水(shuǐ)中浸泡漂洗2分鍾,去除膠表面的SDS。
5 按照(zhào)順序做好轉印三明治結構:
1 負極(陰極)
2一(yī)張四層濾布
3 凝膠
4 轉印膜
5一(yī)張四層濾布
6 正極(陽極)
6 用滾輪趕出氣泡。
7 半幹轉推薦使用恒流轉移:
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一(yī)塊小(xiǎo)型膠(7.3×8.5 cm)
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兩塊小(xiǎo)型膠(7.3×8.5 cm)或一(yī)塊中型膠(8.5×13.5 cm)
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1.5 mm厚度凝膠
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下(xià)列條件(jiàn)基礎上(shàng)增加2分鍾
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下(xià)列條件(jiàn)基礎上(shàng)增加2分鍾
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大于130 kD
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恒流1.3 A,15分鍾
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恒流2.5 A,15分鍾
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5-130 kD
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恒流1.3 A,10分鍾
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恒流2.5 A,10分鍾
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小(xiǎo)于30 kD
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恒流1.3 A,7分鍾
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恒流2.5 A,7分鍾
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注:不同廠家半幹轉儀器(qì)設置可能(néng)有所不同,請根據廠家說明書适當調整。
8 轉膜效率檢測:
轉膜結束後,用蒸餾水(shuǐ)漂洗NC膜,适量麗春紅(hóng)染色液染色2-5分鍾,檢測轉膜效率。