紅(hóng)細胞裂解液

Red Blood Cell Lysis Solution

● 産品包裝：

● 産品簡介：

紅(hóng)細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱ACK Lysis Buffer，是一(yī)種用于從(cóng)人或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無細胞核紅(hóng)細胞的溶液。

本裂解液經過優化配方，在裂解紅(hóng)細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。本裂解液的主要有效成分為(wèi)氯化铵。本裂解液不适用于有細胞核紅(hóng)細胞的裂解，例如鳥或禽類的紅(hóng)細胞。

本産品已經經過過濾處理，溶液為(wèi)澄清透明溶液。如果要使用該産品處理過的血液或組織細胞樣品用于後續的原代培養、細胞融合等細胞培養實驗，建議客戶将溶液經過0.22 μm濾膜抽濾後使用。如果使用該産品處理的樣品進行核酸或蛋白(bái)提取及常規分析測試，可以直接使用該産品。

● 保存及運輸：

4℃保存，一(yī)年(nián)有效；常溫運輸。

● 使用說明：

對于組織細胞樣品需要洗滌液的常規操作步驟：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理，通(tōng)過适當方法分散成細胞懸液，離心棄上(shàng)清。

2. 加入3-5倍細胞體積的紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鍾。例如細胞沉澱的體積為(wèi)1ml，則加入3-5ml的紅(hóng)細胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 400-500g常溫離心5分鍾，棄紅(hóng)色上(shàng)清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可以重複上(shàng)述步驟2和步驟3一(yī)次。通(tōng)常極微量的紅(hóng)細胞不會(huì)影響後續的些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入适量PBS、HBSS、生(shēng)理鹽水(shuǐ)或無血清培養液，重懸沉澱，400-500g常溫離心2-3分鍾，棄上(shàng)清。可再重複1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通(tōng)常應至少為(wèi)細胞沉澱體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可進行計數等後續實驗。

 對于組織細胞樣品無需洗滌的快速操作步驟：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理，通(tōng)過适當方法分散成細胞懸液，離心棄上(shàng)清。

2. 對于0.2ml細胞沉澱加入1ml紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鍾。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生(shēng)理鹽水(shuǐ)或無血清培養液，混勻。

4. 400-500g常溫離心5分鍾，棄紅(hóng)色上(shàng)清。4℃離心效果更佳。

5. 如果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可以重複上(shàng)述步驟2和步驟3一(yī)次。通(tōng)常極微量的紅(hóng)細胞不會(huì)影響後續的一(yī)些檢測。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可進行計數等後續實驗。

   說明：對于常規步驟，多(duō)一(yī)步洗滌過程中的離心，但可以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一(yī)些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一(yī)次離心，但洗滌效果略差一(yī)些，同時需要大體積的離心管。

對于血液樣品需要洗滌的常規操作步驟：

1. 取新鮮抗凝血，400-500g離心5分鍾，離心棄上(shàng)清。

2. 加入6-10倍細胞體積的紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鍾。例如細胞沉澱的體積為(wèi)1ml，則加入6-10ml的紅(hóng)細胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。注意：對于鼠的血液，裂解1-2分鍾已經足夠，對于人的外周血，宜延長(cháng)裂解時間至4-5分鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。

3. 400-500g常溫離心5分鍾，棄紅(hóng)色上(shàng)清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可以重複上(shàng)述步驟2和步驟3一(yī)次。通(tōng)常極微量的紅(hóng)細胞不會(huì)影響後續的一(yī)些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入适量PBS、HBSS、生(shēng)理鹽水(shuǐ)或無血清培養液，重懸沉澱，400-500g常溫離心2-3分鍾，棄上(shàng)清。可再重複1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通(tōng)常應至少為(wèi)細胞沉澱體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可進行計數等後續實驗。

   注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在第一(yī)步中不進行離心棄上(shàng)清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅(hóng)細胞裂解液，并在室溫或4℃裂解4-5分鍾。對于鼠的血液，裂解4-5分鍾已經足夠，對于人的外周血，宜延長(cháng)裂解時間至10分鍾，但通(tōng)常不宜超過15分鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。後續步驟相(xiàng)同。

對于血液樣品無需洗滌的快速操作步驟：

1. 每1ml新鮮抗凝血中加入10ml紅(hóng)細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解4-5分鍾。本步驟在室溫或4度操作均可。注意：對于鼠的血液，裂解4-5分鍾已經足夠，對于人的外周血，宜延長(cháng)裂解時間至10分鍾，但通(tōng)常不宜超過15分鍾，并且裂解過程中宜适當偶爾搖動以促進紅(hóng)細胞裂解。

2. 加入20-30ml PBS、HBSS、生(shēng)理鹽水(shuǐ)或無血清培養液，混勻。

3. 400-500g常溫離心5分鍾，棄紅(hóng)色上(shàng)清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發現紅(hóng)細胞裂解不完全，可以重複上(shàng)述步驟2和步驟3一(yī)次。通(tōng)常極微量的紅(hóng)細胞不會(huì)影響後續的一(yī)些檢測。

5. 根據實驗需要用适當溶液重懸細胞沉澱後即可進行計數等後續實驗。

   說明：對于常規步驟，多(duō)一(yī)步洗滌過程的離心，但可以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一(yī)些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一(yī)次離心，但洗滌效果略差一(yī)些，同時需要大體積的離心管。