Anti-COX
IV抗體(鼠單抗)
Anti-COX IV Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
産品編号
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産品名稱
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規格
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RGC2030
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Anti-COX IV抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 産品簡介
來源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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COX IV分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~17 kD
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注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
COX IV抗體用經過适當修飾的人工(gōng)合成COX IV一(yī)段多(duō)肽作為(wèi)抗原制備而成的抗COX IV小(xiǎo)鼠單克隆抗體。本抗體在Western blot或免疫染色時僅識别COX IV。COX IV抗體可用作線粒體蛋白(bái)上(shàng)樣量的内參。
真核細胞中的細胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase,簡稱COX)是一(yī)種異源寡聚酶,通(tōng)常含有13個(gè)亞基,定位于線粒體内膜,是線粒體呼吸鏈的酶複合物(wù),它可以從(cóng)每4個(gè)還(hái)原性的細胞色素C得到(dào)一(yī)個(gè)電(diàn)子,傳遞給一(yī)個(gè)氧分子,最終把一(yī)個(gè)氧分子轉變成兩個(gè)水(shuǐ)分子。在此過程中細胞色素C氧化酶會(huì)結合4個(gè)質子用于産生(shēng)2個(gè)水(shuǐ)分子,同時把4個(gè)質子轉移到(dào)膜的另外一(yī)側産生(shēng)質子梯度,即建立跨膜的電(diàn)化學勢,随後ATP合成酶可以利于該電(diàn)化學勢合成ATP。細胞色素C氧化酶中構成催化中心的3個(gè)最大的亞基由線粒體DNA編碼,其餘10個(gè)亞基包括COX IV由細胞核内的基因組DNA編碼。細胞色素C氧化酶活性缺陷和人類多(duō)種疾病相(xiàng)關。
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
● 貯存形式:
1 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件(jiàn):
-20℃保存,一(yī)年(nián)有效;避免反複凍融;濕冰運輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜(zá)交(ECL顯色):1:1000-5000稀釋,常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光(guāng)(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實驗示例:
K562懸浮細胞膜蛋白(bái)檢測
樣品:TP為(wèi)RIPA提取總蛋白(bái)做對照(zhào);CY為(wèi)膜蛋白(bái)提取上(shàng)清-胞漿蛋白(bái);M為(wèi)使用不同去垢劑提取的膜蛋白(bái)
電(diàn)泳:4-18% RealPAGE PrecastGel,樣品使用5×速溶性上(shàng)樣緩沖液配成0.5μg/μl,37度30min後上(shàng)樣,上(shàng)樣體積為(wèi)10μl和20μl,
轉膜:0.45μm PVDF膜,1×RealBlot濕轉 400mA 35min。
封閉:快速封閉液 RT 10 min
一(yī)抗:ATPase兔單抗 1:5000 O/N;
GAPDH兔多(duō)抗 1:3000 O/N;
COX
IV鼠單抗 1:5000
O/N。
二抗:羊抗鼠IgG-HRP(貨号:HGM1060) 1:5000 RT
60min;羊抗兔IgG-HRP(貨号:HGM1020) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發光(guāng)液(貨号:EC2520)自(zì)動曝光(guāng)1秒(miǎo)
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