Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)
Anti-β-Actin Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
産品編号
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産品名稱
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規格
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RGA2030
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Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 産品簡介
來源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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β-Actin分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~45 kD
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注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
Actin抗體用經過适當修飾的人工(gōng)合成β-actin N-terminal一(yī)段多(duō)肽作為(wèi)抗原制備而成的抗β-actin小(xiǎo)鼠單克隆抗體。本Actin抗體在Western blot或免疫染色時僅識别β-actin。注意:本抗體不能(néng)用于檢測成年(nián)動物(wù)心肌或骨骼肌的β-actin。
Actin即肌動蛋白(bái),是細胞的一(yī)種重要骨架蛋白(bái),在細胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic、streaming和cytokinesis等過程中起重要作用。Actin大緻可分為(wèi)六種,其中四種是不同肌肉組織特異性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin;另外兩種廣泛分布于各種組織中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大于90%,但在N-terminal同源性僅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。
β-actin的蛋白(bái)水(shuǐ)平通(tōng)常不會(huì)發生(shēng)改變,因此被廣泛用于WB時上(shàng)樣量是否一(yī)緻的參照(zhào),也常被用于免疫染色觀察細胞的微絲結構。在用作WB的參照(zhào)時,Actin抗體和Tubulin抗體的主要不同之處在于兩者所識别蛋白(bái)的分子量不同,這樣可以選擇合适的參照(zhào)在同一(yī)張膜上(shàng)實現同時檢測目标蛋白(bái)和參照(zhào)蛋白(bái)。
本抗體如果用于常規的Western檢測,至少可以檢測20次。
● 貯存形式:
2 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件(jiàn):
-20℃保存,一(yī)年(nián)有效;避免反複凍融;濕冰運輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜(zá)交(ECL顯色):1:5000-10000稀釋,常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光(guāng)(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實驗示例:
樣品:K562細胞,SDS裂解液(貨号:RL1060)提取總蛋白(bái);
電(diàn)泳:RTD6117 4-20% RealPAGE預制膠
轉膜:NC膜,1×RealBlot快速轉膜液快轉400 mA 30 min
封閉:Western封閉液I(BSA)封閉60min
一(yī)抗:Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)(貨号:RGA2030)
1:10000 RT 60min;
二抗:HRP标記羊抗鼠IgG(貨号:HGM1060) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發光(guāng)液(貨号:EC2520)自(zì)動曝光(guāng)1秒(miǎo)