10×膜蛋白(bái)A型上(shàng)樣緩沖液
貨号
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名稱
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規格
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PL130
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10×膜蛋白(bái)A型上(shàng)樣緩沖液
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10×1 ml
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● 産品簡介
該産品配套動物(wù)膜蛋白(bái)提取試劑盒(貨号:RTD8111,RTD8112)和動物(wù)線粒體提取試劑盒(貨号:RTD8115,RTD8116)使用。産品含有甘油和G-250,為(wèi)10倍濃度,使用時稀釋10倍使用。産品用于Blue-Native電(diàn)泳上(shàng)樣使用,不适用于其他系統(如Tris-甘氨酸系統,Bis-Tris系統,HEPES系統,Tricine系統等)電(diàn)泳。
● 貯存、效期和運輸:
-20℃貯存;一(yī)年(nián)有效;濕冰運輸。
● 使用方法:
1 膜蛋白(bái)BN非變性樣品處理:
1.1 建議使用50
μl膜蛋白(bái)重懸液(BN電(diàn)泳用)(貨号:PN1020)重懸膜蛋白(bái)沉澱;
1.2 BCA方法測定蛋白(bái)濃度(貨号:RTP7102);
1.3
用膜蛋白(bái)重懸液(BN電(diàn)泳用)調整蛋白(bái)濃度為(wèi)1
μg/μl,按需分裝,每管50
μl,-80℃保存待用;
1.4 取一(yī)管50
μl樣品,溶化混勻後4℃
16000 g 5分鍾,去除上(shàng)清,保留沉澱;
1.5
沉澱中加入50
μl膜蛋白(bái)增溶液A(貨号:DM1080),輕柔重懸沉澱,盡量不産生(shēng)氣泡,冰浴10分鍾;
1.6
4℃ 16000 g 15分鍾,取上(shàng)清至一(yī)幹淨1.5 ml離心管中即為(wèi)增溶後膜蛋白(bái)溶液(小(xiǎo)心不要吸取沉澱),此時得到(dào)的膜蛋白(bái)濃度為(wèi)1
μg/μl,其中去垢劑DDM(n-Dodecyl
β-D-maltoside,β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷)終濃度為(wèi)1%;
1.7
膜蛋白(bái)溶液中加入1/10體積10×膜蛋白(bái)A型上(shàng)樣緩沖液(配套膜蛋白(bái)增溶液A使用)(貨号:PL130),使用BN凝膠電(diàn)泳(貨号:RTD6139,RTD6140),每個(gè)泳道上(shàng)樣5-20
μg。