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GoldView核酸染色劑

● 産品介紹：

    GoldView 是一(yī)種可代替溴化乙錠（EB）的新型DNA染料，其靈敏度與EB相(xiàng)當，使用方法與之完全相(xiàng)同。在紫外燈下(xià)雙鏈DNA呈現綠色熒光(guāng)。通(tōng)過小(xiǎo)鼠皮下(xià)注射實驗，尚未發現GoldView有緻癌作用。

● 貯存、運輸和效期：

   常溫貯存；常溫運輸；有效期兩年(nián)。

● 實驗操作步驟：

1. 瓊脂糖電(diàn)泳凝膠的制備及染色（預染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下(xià)時，按照(zhào)稀釋10000倍加入Goldview溶液，如100 ml凝膠加入10 μl；徹底搖勻後鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上(shàng)樣電(diàn)泳，電(diàn)泳結束後紫外觀察。

注：預染法，Goldview染色會(huì)出現陰陽膠現象，即随著(zhe)電(diàn)泳時間延長(cháng)，較小(xiǎo)的片段會(huì)染色不清楚，（參見(jiàn)實驗示例），此時可以将凝膠用後染法染色即可看(kàn)到(dào)小(xiǎo)片段條帶。

2. 瓊脂糖電(diàn)泳凝膠的制備及染色（後染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下(xià)時，不要加入Goldview溶液，直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上(shàng)樣電(diàn)泳。

5. 電(diàn)泳結束後将凝膠浸泡在含有Goldview溶液的TAE或TBE染色液中（染色液配制：100 ml 緩沖液中加入100-200 μl Goldview溶液，混勻）染色15-20分鍾；TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鍾。

6. 紫外觀察結果。

● 注意事(shì)項:

1. 膠厚度不要超過0.5cm，膠太厚會(huì)影響檢測的靈敏度。

2. GoldView在pH 3.6-7.0之間能(néng)更好地與核酸結合，因此電(diàn)泳時最好使用新鮮的電(diàn)泳緩沖液。

3. 由于GoldView染色後DNA産生(shēng)綠色熒光(guāng)，因此不适于用一(yī)般單色膠卷拍照(zhào)，可以使用凝膠

成像系統保存圖象。

4. GoldView特别适合于大片段DNA的檢測（大于1kb的片段，檢測靈敏度與EB相(xiàng)當）；當DNA

片段小(xiǎo)于1kb時，檢測靈敏度低(dī)于EB，特别是低(dī)于500bp的片段，GoldView可能(néng)亮度很弱

或檢測不到(dào)。

5. 雖然尚未發現GoldView有緻癌作用，但由于GoldView溶液酸性較強，因此對皮膚、眼睛會(huì)

有一(yī)定的刺激，操作時應戴手套。