伊紅(hóng)染色液

Eosin Staining Solution

●     産品組成：

● 産品簡介：

伊紅(hóng)(Eosin)是一(yī)種化學合成的酸性染料，在水(shuǐ)中解離成帶負電(diàn)荷的陰離子，可以和蛋白(bái)質氨基上(shàng)帶正電(diàn)荷的陽離子結合，可以使細胞胞漿染成不同程度的紅(hóng)色或粉紅(hóng)色，而蘇木(mù)素染色液能(néng)将細胞核染成藍色，與紅(hóng)色胞漿形成鮮明對比，從(cóng)而使蘇木(mù)素伊紅(hóng)(HE)染色成為(wèi)病理組織切片中最廣泛使用的一(yī)種常規染色方法。

本染色液可以重複使用，直至認為(wèi)效果不佳時再換用新的染色液。一(yī)個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。

● 貯存：

RT避光(guāng)保存，一(yī)年(nián)有效。

● 操作步驟：

1.  需要用戶自(zì)己準備的試劑

a.  固定液： 4%多(duō)聚甲醛固定液。

b.  分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；

c.  如果需要脫水(shuǐ)、透明和封片處理，還(hái)需自(zì)備二甲苯，和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無水(shuǐ)乙醇；

d.  70%乙醇。

2.  樣品處理

a.  對于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分鍾。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鍾。

無水(shuǐ)乙醇5分鍾。

90%乙醇2分鍾。

80%乙醇2分鍾。

70%乙醇2分鍾。

蒸餾水(shuǐ)2分鍾。

b.  對于冰凍切片：

固定液固定10分鍾以上(shàng)。

蒸餾水(shuǐ)2分鍾。

c.  對于培養細胞：

固定液固定10分鍾以上(shàng)。

蒸餾水(shuǐ)洗滌2分鍾。

換用新鮮的蒸餾水(shuǐ)，再洗滌2分鍾。

3.  伊紅(hóng)染色

對于上(shàng)述處理好的樣品：

伊紅(hóng)染色液染色30秒(miǎo)-2分鍾(可以根據染色結果和要求調整時間)。 此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水(shuǐ)、透明後封片按後續步驟進行，70%乙醇洗滌後仍可按照(zhào)後續步驟進行脫水(shuǐ)、透明和封片處理。

注：如果用于免疫組化等染色後的複染，可以參考上(shàng)述步驟在其它染色完成後直接進行伊紅(hóng)染色。

4.  脫水(shuǐ)、透明、封片或進行其它染色

a.  脫水(shuǐ)、透明、封片：

70%乙醇10秒(miǎo)，80%乙醇10秒(miǎo)，90%乙醇10秒(miǎo)，無水(shuǐ)乙醇10秒(miǎo)。二甲苯透明5分鍾。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分鍾。

用中性樹膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下(xià)觀察，細胞漿呈粉紅(hóng)色或紅(hóng)色。

b.  進行其它染色：

如果進行免疫熒光(guāng)染色，或進行Hoechst等熒光(guāng)染料的染色，在伊紅(hóng)染色液染色後： 70%乙醇洗滌2次，每次2分鍾。 PBS或生(shēng)理鹽水(shuǐ)或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光(guāng)染料染色的溶液浸泡5分鍾。 然後就(jiù)可以進行免疫熒光(guāng)染色或其它熒光(guāng)染料的染色了。如果免疫熒光(guāng)染色效果不佳，可能(néng)染料對抗體結合有影響，請單獨染色。