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EB染色液

● 産品簡介：

EB染色液是EB的水(shuǐ)溶液，濃度為(wèi)10mg/ml。EB（溴化乙錠）能(néng)與核酸分子特異結合，用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應用于核酸電(diàn)泳前後的染色以及流式細胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠（Ethidium Bromide；C₂₁H₂0N₃Br；分子量為(wèi)394.32）含有一(yī)個(gè)可以嵌入DNA 堿基的三環平面基團。它與DNA 的結合沒有堿基序列特異性。大約每2.5 個(gè)堿基插入一(yī)個(gè)溴化乙錠分子。當染料分子插入後，紫外激發後呈現熒光(guāng)，可以檢測到(dào)10ng 的DNA 條帶。

● 保存、運輸及效期：

常溫避光(guāng)保存；常溫運輸；有效期兩年(nián)。

● 注意事(shì)項：

    EB有一(yī)定毒性，使用時請使用一(yī)次性手套操作，注意防護！

●  使用說明：

使用前，先離心快甩EB溶液至管底，以防開(kāi)蓋後EB造成的污染。

1. 瓊脂糖電(diàn)泳凝膠的制備及染色（預染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下(xià)時，按照(zhào)稀釋10000倍加入10 mg/ml EB溶液，如100ml凝膠加入EB量為(wèi)10 μl；徹底搖勻後鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上(shàng)樣電(diàn)泳，電(diàn)泳結束後紫外觀察。

注：預染法，EB染色會(huì)出現陰陽膠現象，即随著(zhe)電(diàn)泳時間延長(cháng)，較小(xiǎo)的片段會(huì)染色不清楚。參見(jiàn)實驗示例。可以将凝膠用後染法染色即可看(kàn)到(dào)小(xiǎo)片段條帶。

2. 瓊脂糖電(diàn)泳凝膠的制備及染色（後染法）：

1. 按照(zhào)所需濃度稱取瓊脂糖，加入TAE或TBE緩沖液，在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下(xià)時，不要加入EB溶液，直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固後，将梳子輕輕拔出。

4. 上(shàng)樣電(diàn)泳。

5. 電(diàn)泳結束後将凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中（染色液配制：100ml 緩沖液中加入100-200 μl EB溶液，混勻）染色15-20分鍾；TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鍾。

6. 紫外觀察結果。

●  實驗示例：