Aureobasidin A Solution

金擔子素A溶液 1mg/ml

● 産品包裝：

● Storage：-20℃

Stock solutions may be stored at-20°Cfor up to 12 months

● Specifications:

Appearance:  Colorless, Clear methanol liquid

Sterilization：Filtration

Concentration：1mg/ml in methanol

●    Introduction：

一(yī)、關于AbA：

金擔子素A（Aureobasidin A，AbA）是從(cóng)絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分離出來的環酯肽類抗生(shēng)素，具有很強的抗真菌能(néng)力。AbA作用機(jī)制是抑制酵母中AUR1基因編碼的肌醇磷酰胺（inositol phosphorylceramide，IPC）合成酶的活性，幹擾鞘脂合成，從(cóng)而殺死菌株。AbA在較低(dī)的濃度下(xià)（0.1-0.5 μg/ml）即可對酵母産生(shēng)毒性。編碼IPC合成酶的基因研究較多(duō)的來自(zì)釀酒酵母菌的AUR1基因，以及構巢曲黴的AURA基因，兩者具有同源性。通(tōng)過對編碼AUR1-C基因進行突變即可使得菌株對AbA産生(shēng)抗性，作為(wèi)蛋白(bái)質互作研究的報(bào)告基因。

因為(wèi)AbA可以直接殺死敏感的酵母菌株，而不是延遲菌株生(shēng)長(cháng)，所以AbA篩選有利于陽性克隆的生(shēng)長(cháng)和識别。與營養報(bào)告基因（如HIS3）進行低(dī)嚴緊度初篩相(xiàng)比，AbA篩選大大消除了背景克隆。實際操作中，用AbA進行初篩時會(huì)獲得更多(duō)克隆，之後再用4個(gè)報(bào)告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1)進行高(gāo)嚴緊度的二次篩選以驗證陽性克隆。AbA非常适合用作陽性克隆子篩選用的藥物(wù)選擇性标記；也是酵母單/雙雜(zá)交研究中理想的報(bào)告子，可以簡化酵母雙雜(zá)交文庫篩選。

二、使用方法：

1.本品為(wèi)AbA的甲醇溶液，濃度為(wèi)1 mg/ml，直接用作儲存液。

2.滅菌後YPD Agar培養基冷卻至50-55 ℃，加入适量的AbA儲液，倒闆備用。（AbA工(gōng)作濃度取決于宿主細胞的敏感度，見(jiàn)下(xià)表）

3.制備酵母感受态細胞并完成轉化。

4.把100 μl完成轉化酵母細胞懸液塗到(dào)含有适量AbA的YPD Agar培養基平闆上(shàng)，30℃培養2-4天。

5.挑取克隆鑒定，或統計轉化效率。

三、不同菌株建議AbA的工(gōng)作濃度：

四、對AbA敏感的真菌：

出牙酵母（Saccharomyces cerevisiae）、粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光(guāng)滑念珠菌（Candida glabrata）、構巢曲黴（Aspergillus nidulans）和黑(hēi)曲黴（A. niger.）。